背景

肝细胞癌（HCC）是严重危害我国人民健康的重大公共卫生问题，每年死亡病例31.65万（居第2位），5年生存率仅为15%。HCC发病率高、病死率高，积极寻求有效的治疗方案是本领域的国际前沿难题。沙参-麦冬药对首载于我国清代名医魏之琇所著《续名医类案》，清代《柳州医话》中首次记载沙参-麦冬药可配伍用于治疗多种肝脏疾病。
阴虚是肝细胞癌的一个重要发病机制，特别是对于中晚期患者，其主要证型为气阴两虚，而多种有创检查、微创治疗、手术治疗、以及化疗会进一步加重患者阴虚。因此，沙参-麦冬药对是肝癌患者治疗中的重要滋阴配伍。然而，其肝癌治疗作用机制尚未明确。

日前，一篇名为“Mechanism of Shashen-Maidong herb pair in treating hepatocellular carcinoma using network pharmacology and experimental validation”的文章评估了沙参-麦冬（SS-MD）药对在肝癌中的治疗作用。

图1 论文首页

基于UPLC-Q-Orbitrap-MS/MS技术鉴定沙参-麦冬药对中的已知成分

利用UPLC-Q-Orbitrap-MS/MS技术，鉴定沙参-麦冬药对中的已知小分子化合物，结果显示，沙参活性成分槲皮素含量为951ng/g（图2A-B），麦冬活性成分麦冬皂苷C含量为1399.8ng/g（图2C-D）和甲基麦冬黄烷酮B含量为 3146.7 ng/g（图2E-F），峰形尖锐对称，待测物均可被显著分离。

图 2 

中药-成分-靶点网络构建及分析

首先对SS-MD治疗靶点和肝癌相关靶点进行了网络映射，获得645个SS-MD治疗肝癌的潜在靶点（图3A）。为筛选治疗活性成分，构建了中药-成分-靶点网络（图3B）。红色V形节点代表SS和MD，紫色椭圆节点代表潜在靶点。橙色矩形节点代表潜在活性化合物。拓扑分析获得SS-MD治疗HCC的前10位潜在活性成分，包括β-谷甾醇（De = 86），麦冬黄烷酮C（De = 84），麦冬二氢高异黄酮B（De = 83），麦冬黄烷酮E（De = 82），豆甾醇（De = 82），麦冬皂苷A（De = 81），芦丁（De = 81），麦冬皂苷B（De = 81），西托糖苷（De = 80），以及槲皮素（De = 79）。

图 3 

PPI网络构建及分析

利用STRING数据库，构建潜在靶点的蛋白互作网络（图4A）。利用MCODE和ClusterONE聚类分析，抓取功能性蛋白复合物用于构建核心子网络（图4D）。进一步拓扑分析筛选出前5%的靶点为SS-MD治疗HCC的核心靶点，包括 EGFR（DE = 112）、TP53（De = 111）、STAT3（DE = 118）、GAPDH（De = 117）、AKT1（De = 114）和 HRAS（De = 113）。

图 4 

分子对接和分子动力学模拟验证

【肝癌】揭秘神奇药对：沙参-麦冬如何成为肝癌治疗的新希望！
利用AutoDock Vina进行分子对接，并对结合能最强的三对蛋白-配体复合物进行分子对接的三维构象模拟和二维模拟验证。包括EGFR与β-谷甾醇（−9.2 kal/mol）、芦丁（−9.4 kal/mol）以及西托糖苷（−9.6 kal/mol）（5A）。对结合能力最强的EGFR与β-谷甾醇通过分子动力学模拟进一步验证其动态结合稳定性（图5E-G）。

图 5 

GO和KEGG富集分析

SS-MD治疗HCC的作用通路主要富集在癌症通路（KEGG:05200）、Notch 信号通路（KEGG:04330）和细胞凋亡信号通路（KEGG:04210）（图6A）。主要富集在细胞凋亡过程（GO:0006915）、细胞因子产生的正调控（GO:0001819）、免疫反应的调节（GO:0050776），以及 T 淋巴细胞增殖、分化和免疫反应等生物学过程（图6B）。

图 6 

SS-MD药对可增加肝癌H22荷瘤小鼠CD8+T细胞数量

研究表明，沙参-麦冬药对的高、中剂量均可显著提高荷瘤小鼠脾脏、外周血、淋巴结中CD3+T细胞数量（图7A-E）。对T细胞亚群进一步分析表明，高剂量组可进一步提高外周血中CD8+T细胞数量，中剂量干预可提高脾脏、外周血、淋巴结中CD8+T细胞的比例（图7G-J）。免疫荧光检测表明，不同剂量沙参-麦冬药对干预均可显著增加荷瘤小鼠肿瘤组织中 CD8+T 细胞的浸润（图7K，L）。

图 7 

沙参-麦冬药对可改善肝癌CD8+T细胞效应功能

流式细胞术检测显示，沙参-麦冬药对干预可提高CD8+T细胞效应亚群的数量（图8A、B-E），降低终末分化亚群水平（图8A、F-I）。此外，还评估了肿瘤组织中CD8+T细胞分泌效应因子水平，结果显示，沙参-麦冬治疗显著增加肝癌肿瘤组织中CD8+T细胞TNF-α、IFN-γ和 IL-2的分泌水平，降低Annexin V表达，抑制其凋亡（图8J-K）。转录因子T-bet和Eomes在调节CD8+T细胞的分化和效应功能方面起着重要作用，Western blot检测显示，沙参-麦冬干预可增加T-bet表达，降低Eomes表达（图8N-P）。以上表明，沙参-麦冬药对增加了肝癌免疫微环境中CD8+T细胞效应亚群的比例，降低终末分化亚群比例，促进CD8+T细胞细胞因子的分泌，提高其效应功能，并抑制其凋亡。

图 8 

沙参-麦冬药对降低CD8+T细胞Notch信号通路表达水平

为验证沙参-麦冬药对治疗HCC的潜在信号通路，免疫组化及Western blot检测显示，沙参-麦冬药对可降低Notch通路相关蛋白Notch-1、RBP-Jκ及Hes-1在荷瘤小鼠肿瘤组织中表达（图9A-C）。流式细胞术检测显示其可抑制CD8+T细胞中关键信号分子Notch-1的表达（图9H）。

图 9 

沙参-麦冬药对通过阻断Notch信号通路减轻CD8 T细胞凋亡

为了进一步探究沙参-麦冬药对改善CD8+T细胞效应功能的机制，进行了体外实验。从健康小鼠中提取原代脾淋巴细胞，并与肝癌H22细胞系共培养，用Notch通路阻断剂及药对含药血清进行干预。结果显示，与对照血清组相比，DAPT 组、SS-MD组以及 SS-MD+DAPT 组中CD8+T细胞Annexin V表达水平均显著降低（图10）。SS-MD组与SS-MD+DAPT组中CD8+T细胞上Annexin V表达水平无统计学显著差异。

图 10

沙参-麦冬药对通过阻断Notch信号通路改善CD8 T细胞效应功能
检测共培养体系中CD8+T细胞分泌细胞因子、穿孔素和颗粒酶 B 的水平显示，与对照血清组相比，DAPT组、SS-MD组以及SS-MD+DAPT组中CD8+T细胞的TNF-α, IFN-γ, IL-2, Granzyme B水平显著升高。SS-MD组和SS-MD+DAPT组间上述指标无统计学差异（图10）。
结论
本研究结合网络药理学分析、分子对接和分子动力学模拟，及体内外实验验证，探索了沙参-麦冬药对在肝癌治疗中的关键成分、靶点和信号通路，并证实沙参-麦冬药对可通过阻断 Notch 信号通路抑制肝癌 CD8+T 细胞凋亡，调节其亚群分布，并改善其效应功能。为中医药在肝癌治疗中的免疫调节作用提供了理论支持。

参考文献：

Xie YQ, Yan FN, Yu LH, Yan HW, Kong YX, Yang ZY. Mechanism of Shashen-Maidong herb pair in treating hepatocellular carcinoma using network pharmacology and experimental validation.J Ethnopharmacol. 2025;337(Pt 3):118954. doi:10.1016/j.jep.2024.118954
作者｜宇晴
编辑 | 竹子

#artContent h1{font-size:16px;font-weight: 400;}#artContent p img{float:none !important;}#artContent table{width:100% !important;}