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1927年，秋收起义进攻长沙受挫后，毛泽东当机立断，改变原定部署，决定到敌人控制比较薄弱的山区寻求立足地。起义部队离开文家市后，在萍乡芦溪遭到敌人袭击，总指挥卢德铭为掩护突围牺牲，时年22岁。后部队退至莲花县，并占领县城。在莲花县，毛泽东与当地原中共组织负责人取得了联系，进一步了解到了井冈山周围的一些情况。

井冈山位于罗霄山脉的中段，方圆有500多华里，地势险峻，道路可通大湖南、江西两省，山下周边几个县诸如莲花、永新、宁冈、遂川、茶陵、酃县物产丰富，有一定的物质基础，而且大革命前后，都有过大规模的群众斗争，1927年8月永新、安福、莲花、宁冈四县农军联合攻取永新县城的行动，有的还建立了较强的农民武装。当时井冈山有两支受共产党影响的地方武装，即袁文才部和王佐部，他们曾积极参加上述攻打永新县城的行动，袁文才还加入了党的组织。

当秋收起义部队行至永新县三湾村时，毛泽东随即派人与原宁冈中共组织负责人及袁、王部队联络，面对部队当时的实际情况，对起义部队进行了改编，部队由1个师缩编为1个团；各级都建立了党组织，党支部建在连上，连以上设党代表；部队内部实行民主管理。史称“三湾改编”。这不仅扫除了部队中的低沉情绪，提高了部队的凝聚力，而且为建立一支在党绝对领导下的新型人民军队（“党指挥枪”）奠定了基础。后来，毛泽东为部队制订了“三大任务”和“三大纪律、六项注意”，具体规定了人民军队的性质和任务。

1927年10月初，部队离开三湾进至宁冈县古城，毛泽东得知朱德在广东潮汕失败的消息，毛泽东考虑就在罗霄山脉中段落脚。此时，革命意志薄弱的师长余洒度和原三团团长苏先骏，脱离了部队，后两人均叛变投靠了蒋介石。10月27日，在王佐的迎接下，毛泽东到达茨坪，最终上了井冈山。从10月到次年2月近半年的时间里，井冈山周围各县的党组织陆续恢复，部队相继攻占茶陵、遂川、宁冈县，建立了三县的工农兵政府，打退江西敌军的第一次“进剿”，袁、王部队升编为工农革命军第二团，井冈山革命根据地初具规模。

毛泽东很关心着朱德部队的动向。潮汕失败后的朱德，转战湘粤赣边界，二人都互派人员进行了联络。1928年初，朱德、陈毅、王尔琢率部参加湘南暴动，声威震动数省。3月间，中共湘南特委派代表到井冈山，由于受“左”倾盲动思想的影响，把党中央免除毛泽东的临时政治局候补委员的决定，误传成开除党籍；而且取消了以毛泽东为书记的前敌委员会，毛泽东改任师长。同时，强令部队前往湖南，致使井冈山根据地被敌占领一个多月。同月底，湘南暴动失败，南昌起义余部和湖南农军向井冈山撤退，毛泽东率部积极掩护部队上山。4月下旬，朱德、毛泽东在井冈山下会师。

5月4日，在宁冈县的砻市召开庆祝大会，宣布中国工农革命军第四军成立，朱德任军长，毛泽东任军党代表，王尔琢任军参谋长。后改称中国工农红军第四军，全军万余人，枪2000余支。

5月20日召开了中共湘赣边界第一次代表大会，毛泽东在会上初步回答了“红旗到底打得多久”的疑问，提出了“工农武装割据”的重要思想。会议选举产生了中共湘赣边界特别委员会，毛泽东为书记。这期间，毛泽东提出了“敌进我退，敌驻我扰，敌疲我打，敌退我追”游击战争基本原则。

1928年4月至7月，红四军连续打破江西敌军的第二、三、四次“进剿”和湘赣两省敌军的第一次“会剿”。其中，龙源口大捷，歼灭敌军1个团、击溃两个团、缴枪千余支，获得空前胜利。在军事胜利的推动下，土地革命如火如荼地开展，根据地区域迅速扩大至宁冈、永新、莲花三个全县，遂川、酃县、茶陵、吉安、安福各一部分，面积达7.2千平方公里，人口达50万，此时，湘赣边界工农兵苏维埃政府正式成立，根据地进入全盛时期。