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你是否想过，长期压力不仅会让人情绪低落，还可能悄悄损伤大脑深处关键的神经？在大脑内，蓝斑核（LC）就像一个精密的 “去甲肾上腺素调控中心”，它维持着神经稳态，一旦受损，就可能牵出焦虑、抑郁甚至阿尔茨海默病的隐患。但长期压力究竟是如何一步步 “摧毁” 蓝斑核神经元的？一直是神经科学领域的未解之谜。

2025年10月9日，日本大阪大学Hiroki Toyoda 团队，在eLife杂志发表题为《Chronic stress impairs autoinhibition in neurons of the locus coeruleus to increase asparagine endopeptidase activity》的文章，本研究聚焦慢性束缚应激（RS）对蓝斑核（LC）神经元的损伤机制：慢性 RS 通过Ca²⁺依赖的 α2A 肾上腺素能受体（α2A-AR）内吞，破坏 LC 神经元中由 α2A-AR 偶联内向整流钾电流（GIRK-I）介导的自抑制作用，导致神经元过度兴奋；过度兴奋伴随胞内 Ca²⁺升高，激活Ca²⁺依赖的单胺氧化酶 A（MAO-A） ，使去甲肾上腺素（NA）代谢生成 3,4 – 二羟基苯乙醛（DOPEGAL）；DOPEGAL 进一步激活天冬酰胺内肽酶（AEP），促使 tau 蛋白切割产生 tau N368 片段，最终引发 LC 神经元退化，与焦虑、抑郁症及阿尔茨海默病（AD）病理相关，而抑制 α2A-AR 内吞或为潜在治疗方向。

首先，作者通过电生理实验验证 LC 神经元自抑制的核心机制。对 LC 神经元施加 75pA、100pA 电流刺激，记录到典型的 spike 频率适应（SFA）：spike 累积数量随刺激时间呈饱和式增长，符合 Monod 方程（y=(a×x)/(b+x)），当使用α2A-AR 拮抗剂 阿替美唑处理后，SFA 完全消失，spike 累积数量转为线性增长，且脉冲后超极化显著减弱。进一步检测 NA 诱导的 GIRK 电流，发现 NA 可激活典型的内向整流电流，而 阿替美唑 可完全阻断该电流，内向与外向成分幅度均显著降低。以上结果表明，LC 神经元的 SFA 是 α2A-AR 激活后偶联 GIRK-I 的自抑制效应，该通路是防止神经元过度兴奋的关键。

作者发现单独施加 NA 不会导致 GIRK-I 衰减，但在含 30mM TEA（增强 Ca²⁺内流）的外液中，施加 “5 组 ×20 个正脉冲（20Hz）+ 斜坡脉冲” 的复合刺激，可观察到 GIRK-I 逐渐衰减：20 次刺激后，NA 诱导的 GIRK-I 几乎完全消失，内向（-130mV）与外向（-60mV）成分幅度降至 0，I-V 曲线显示电流轨迹从 NA 诱导的整流形态转为基线水平。为验证 α2A-AR 内吞的作用，使用 β-arrestin/AP2 复合物抑制剂 barbadin（阻断受体内吞），结果显示 barbadin 处理后，20 次复合刺激未引起 GIRK-I 明显衰减，动态监测中电流幅度基本稳定，与对照组（空心圆）的显著衰减形成鲜明对比，定量分析显示两组差异显著。这证明 GIRK-I 的衰减是 Ca²⁺依赖的 α2A-AR 内吞导致，而非电流本身的失活。

接下来，作者通过分子实验检测 RS 对 α2A-AR/GIRK 的影响。免疫荧光实验显示，3 天 RS 小鼠 LC 神经元（TH 阳性）膜上 α2A-AR 的免疫信号显著弱于对照组，且与膜标记物 Na⁺/K⁺-ATP 酶的共定位减少。Western blot分析进一步验证：3 天 RS 小鼠 LC 组织的膜组分中，α2A-AR 蛋白水平显著降低，而胞质组分无显著差异；3 天 RS 组 LC 中 α2A-AR、GIRK1、GIRK2 的 mRNA 水平均显著下降。电生理实验同步显示，RS 时间越长，NA 诱导的 GIRK-I 幅度越小：1 天 RS 即显著低于对照，3 天达平台，符合饱和函数拟合，证明 RS 通过降低膜上 α2A-AR/GIRK 的表达与功能，破坏自抑制通路。

RS 激活 MAO-A/DOPEGAL/AEP 病理通路

接下来，作者想检测 RS 对下游病理分子的影响。Western blot 分析显示，5 天 RS 小鼠 LC 神经元中：MAO-A 蛋白水平显著升高；AEP 的前体（pro-AEP）与活性形式（active-AEP）均显著增加；tau 蛋白及 AEP 特异性切割产物 tau N368 片段（35kDa）的表达显著上调。同时，Y迷宫行为学测试显示，5 天 RS 小鼠在 “新臂” 的探索时间显著减少，空间记忆受损，模拟 AD 早期认知障碍。这些结果表明，RS 通过激活 MAO-A，促进 NA 代谢生成 DOPEGAL，进而激活 AEP 并诱导 tau 蛋白异常切割，最终引发 LC 神经元病理损伤与认知功能下降。

最后，作者整合上述结果，提出完整机制模型。正常状态下，LC 神经元发放 spike 后自分泌 NA，NA 结合膜上 α2A-AR 并激活 GIRK-I，产生自抑制效应；NA 缓慢解离受体后被 NAT 摄入胞质，大部分由 VMAT2 回收至囊泡，胞质 NA 浓度低，MAO-A 活性弱，无病理分子积累。慢性RS状态下，RS 诱导 LC 神经元过度兴奋→胞内 Ca²⁺升高→α2A-AR 与 β-arrestin/AP2 结合并内吞→膜上 α2A-AR/GIRK 减少→自抑制失效，神经元持续过度兴奋；过度兴奋促进 NA 自分泌，且 α2A-AR 缺失使 NA 直接被 NAT 快速摄入胞质→囊泡 NA 泄漏增加→胞质 NA 积累；Ca²⁺升高进一步增强 MAO-A 活性，NA 代谢生成 DOPEGAL→激活 AEP→tau 蛋白切割为 tau N368→LC 神经元退化。该模型清晰揭示了 RS 从破坏自抑制到引发病理损伤的完整通路，且提示抑制 α2A-AR 内吞可能是焦虑 / AD 的潜在治疗方向。

作者发现，蓝斑核（LC）神经元存在尖峰频率适应现象，该现象由单个尖峰发放后 α2A 肾上腺素能受体（α2A-AR）偶联内向整流钾电流（GIRK-I）介导的自抑制作用引起；同时发现，由于 α2A 肾上腺素能受体（α2A-AR）发生内吞，α2A-AR 偶联的 GIRK 电流呈现钙（Ca²⁺）依赖性衰减，进而导致尖峰频率适应现象消失，且神经元兴奋性升高。

免疫组织化学检测与蛋白质印迹（Western blot）分析结果显示，慢性束缚应激（RS）后，蓝斑核神经元细胞膜上 α2A-AR 的表达水平显著降低。与之一致的是，随着慢性束缚应激持续时间的延长，蓝斑核神经元中去甲肾上腺素（NA）诱导的 GIRK 电流也逐渐减弱。此外，慢性束缚应激后，单胺氧化酶 A（MAO-A）、天冬酰胺内肽酶前体（pro-AEP）、活性形式天冬酰胺内肽酶（active-AEP）以及 tau 蛋白和 tau N368 片段的蛋白质水平均显著升高。

基于这些研究结果，作者提出了一种新机制，可解释慢性束缚应激如何破坏自抑制作用、升高胞质内游离去甲肾上腺素（NA）水平 —— 这些游离 NA 会被钙（Ca²⁺）依赖性增强的单胺氧化酶 A（MAO-A）代谢，最终导致天冬酰胺内肽酶（AEP）活性升高并产生 tau N368 蛋白。