一文读懂
APTT纠正试验
什么是APTT
APTT即活化部分凝血酶时间测定，是在37°C条件下，以白陶土（或鞣花酸）激活因子ⅩⅡ和ⅩⅠ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板第三因子，在钙离子的参与下，观察乏血小板血浆凝固所需要的时间。因此，APTT反映了从因子ⅩⅡ和ⅩⅠ被激活，到纤维蛋白形成，血浆凝固的时间。是内源性凝血系统较为敏感和常用的筛选实验。
为什么要做APTT纠正试验？
从APTT测定的原理和瀑布学说可以看出，能够影响APTT结果的因素有很多。
1.凝血因子缺乏：生成缺乏,如血友病等；消耗过多，如使用肝素类药物等或者DIC等导致凝血因子大量消耗。
2.因子抑制物的存在：凝血因子含量正常也可能导致APTT延长，比如Ⅷ因子抗体的出现，低分子肝素导致Ⅹa因子活性受抑进而导致APTT延长。
3.狼疮抗凝物的存在：LA是一组能与负电荷磷脂-蛋白复合物或与负电荷磷脂结合的免疫球蛋白，能通过干扰磷脂与相关凝血因子结合，导致APTT延长
4.抗磷脂抗体的存在：当血液中存在磷脂抗体，会导致APTT延长
可见，造成APTT延长的因素有很多，正确的筛查延长的原因可以尽早合理诊疗，更高效的服务患者。
APTT延长混合血浆纠正试验是将患者血浆（patient plasma,PP）与正常混合血浆（Normal Pooled Plasma,NPP）按照一定的比例混合后多次检测APTT，评估混合血浆APTT“纠正”的程度，为确诊实验的选择提供指导。
什么时候需要做APTT纠正试验？
建议 APTT结果不明原因超出正常上限至少5秒，患者有相关症状、体征或临床医生需要进一步了解APTT延长的原因时，可启动APTT纠正试验
注意：APTT不明原因明显超出正常上限时即可考虑启动APTT纠正试验
排除一下情况
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分析前因素：例如抗凝剂种类错误；标本采集量错误； HCT>55%；VAD；输液同侧采血等。
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明确抗凝治疗：患者是否使用肝素类抗凝药物。
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明确诊断：患者受否患有肝脏疾病、鼠药中毒、DIC等
APTT纠正试验具体操作？
正常混合血浆NPP的制备
1、建议优先使用商品化的正常血浆
2、至少20份（男女比例相等为最佳）常规凝血试验均正常的血浆混合制备（理想凝血因子水平应在80-120%之间）。
注意：应避免选择感染、肿瘤、创伤、术后、妊娠、新生儿、肝炎、自身免疫性疾病等人群样本（这类人群即使APTT在正常范围内，但各凝血因子水平差异可能较大），
个体样本性状要求无溶血、凝块、黄疸和脂血等
3.自制的NPP需再次离心（离心力1500g,时间15分钟）以排除血小板干扰后，上机测定APTT结果。
4.最好每次做APTT纠正试验前新鲜制备。
操作方法：
1.所有混合后血浆检测APTT均应即刻进行，排除放置时间过久导致的试验误差，避免影响结果判断。
2.孵育时间不超过2小时，封口膜一定要封好，水浴箱里面的水一定要接触到小反应杯。
结果分析：
1.APTT3、APTT6与APTT7均纠正提示凝血因子缺乏，不存在抑制物；
2.APTT3纠正、APTT6延长超过相应的截断值，提示存在抑制物且为时间和温度依赖性；
3、APTT3、APTT6与APTT7均不纠正、APTT6比APTT7延长不超过相应的截断值，提示存在抑制物，但抑制作用不存在时间和温度依赖性；若APTT6比APTT7延长超过相应的截断值，则抑制作用有时间和温度依赖性。
4、APTT4、APTT5与APTT7分别作为APTT1、APTT2与APTT3的平行对照，以便于对实验条件进行监控。当后者相比较前者明显延长时，则提示实验过程中有不稳定因素，如孵育温度超过可接受范围或者存在PH值的明显变化，那么有理由认为该次试验的结果不可信，需要重新进行孵育试验。
APTT纠正试验–即刻法
1.循环抗凝物指数（ICA）方法
RI=[(APTT3-APTT2)/APTT1]×100%
RI截断值范围为10%-15%
<10%提示因子缺乏，>15%提示存在凝血抑制物
10%-15%为临界值（灰区）
2.百分比纠正法
%纠正=[(APTT1-APTT3)/（APTT1-APTT2）]×100%
%纠正截断值范围在65%-80%之间
>80%提示因子缺乏，<65%提示存在凝血抑制物
65%-80%为临界值（灰区）
复杂情况分析
当同时存在多种抑制物或抑制物与凝血因子缺乏同时存在时，结果解释将变得复杂，需结合患者病史、临床表现和其它凝血检查进行综合分析。
例如在服用华法林且APTT延长的患者中，样品会同时包含凝血因子缺乏和病理性抗凝物质（例如LA）等诸多复杂的临床问题。
若怀疑同时存在LA与肝素，可通过TT来鉴别；若怀疑同时存在LA与多种凝血因子缺乏（如肝脏疾病等），可结合PT结果分析。
低滴度的FⅧ抑制物即刻试验可纠正，但孵育试验不能纠正。
危重患者可能同时存在凝血因子消耗、肝脏器官功能障碍而影响凝血因子生成、各种免疫细胞、内皮细胞释放物质对凝血系统综合影响而表现为凝血试验异常，所以该种临床状况不适合进行APTT纠正试验。
小结
APTT纠正试验虽然是一种高效的筛查实验，但仍需结合纠正结果和患者临床症状综合分析。日常工作中需重视临床沟通，有效诊断。
参考文献：
[1] 中国研究型医院学会血栓与止血专委会. 活化部分凝血活酶时间延长混合血浆纠正试验操作流程及结果解读中国专家共识[J]. 中华检验医学杂志,2021,44(8):690-697. DOI:10.3760/cma.j.cn114452-20201202-00870.
END
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