微精选

如图1（药物-成分-靶点网络图）所示，该网络模型由172个节点构成，直观展示了62个活性成分与104个冠心病候选靶点之间的复杂相互作用关系。网络分析识别出瓦里西苷、乙酸冰片酯、川芎烯酮和花生四烯酸为关键活性成分，并揭示了多种成分共同作用于单一或多个靶点的特点，体现了中药多成分、多靶点的协同作用机制。结果揭示了心痛宁治疗冠心病多成分-多靶点的协同作用机制。

研究者通过STRING数据库与Cytoscape软件构建并可视化了蛋白质相互作用网络（图2A），该网络揭示了与细胞凋亡、激素调节、血液调控、免疫及炎症等关键生物学过程相关的核心蛋白；进一步对网络中排名前30的核心蛋白进行定量展示（图2B），从而系统性地描绘了该PPI网络的核心组成与潜在功能。综上，PPI网络分析鉴定出一系列调控细胞凋亡、免疫、炎症等生命过程的核心蛋白。

XTN的候选靶点广泛参与了核受体活性、免疫调节、应激反应及代谢过程等多种生物学功能，揭示了其多靶点作用的特点 (图3A)。KEGG通路富集分析进一步表明，这些靶点可能通过调控PI3K-Akt、MAPK、Ras以及内分泌耐药等关键信号通路来发挥治疗冠心病的作用 (图3B)。结果共同揭示了XTN通过多靶点、多通路协同作用对抗冠心病的潜在机制。

通过MTT实验发现，与模型组相比，不同浓度的XTN能显著提升H9c2细胞的存活率，证明了XTN对氧化应激损伤的细胞具有保护作用 (A)；流式细胞术检测结果显示，XTN处理后细胞的凋亡率较模型组有所下降，表明XTN能抑制H2O2诱导的细胞凋亡 (B)；JC-1染色结果表明，XTN处理组的线粒体膜电位有所升高，提示XTN可能通过稳定线粒体膜电位来发挥抗凋亡作用 (C)。结果表明XTN通过提高细胞活力、降低凋亡率并稳定线粒体膜电位来保护H9c2细胞免受氧化应激损伤。

为探究XTN对细胞凋亡的影响，本研究采用RT-qPCR技术分析XTN对Bax与Bcl-2 mRNA表达的作用。与对照组相比，过氧化氢处理组的Bax表达水平显著升高，而Bcl-2表达水平明显下降。相比之下，模型对照组与半夏白术天麻汤及各浓度XTN干预组比较，后者Bax表达均呈现显著下调，同时Bcl-2表达水平出现明显上调（图5）。结果表明XTN的抗冠心病作用机制与凋亡信号通路密切相关。

为进一步验证XTN对冠心病的保护作用，作者进行了HE染色病理学检测。如图6所示，假手术组大鼠心脏组织结构完整，细胞边界清晰，排列规整，细胞大小正常，形态自然，未见梗死病灶；模型组心脏组织严重紊乱，表现为细胞肿胀、边界模糊、细胞间隙增宽，并伴有大量炎性细胞浸润、细胞破裂及溶解现象。在药物治疗方面，XTN（0.16 mg/kg）给药组对心肌缺血所致的心肌组织病理学改变有轻微改善作用；而0.48 mg/kg和0.96 mg/kg剂量的XTN则能显著缓解冠状动脉结扎引起的心脏损伤，表现为细胞间隙相对正常、边界清晰分明。因此，与模型组相比，XTN能剂量依赖性地改善AMI大鼠的心脏组织损伤。

采用Tunel染色法评估XTN在体内对心肌细胞凋亡的保护作用。应用免疫组化染色法初步探讨XTN保护大鼠心肌细胞免受凋亡损伤的机制。如图7所示，与假手术组相比，模型组的细胞凋亡指数显著升高。而低、中、高剂量XTN治疗组的凋亡指数均较模型组明显下降。此外，模型组Caspase-3与Bax蛋白阳性表达率均高于假手术组（p < 0.01），但BXW与XTN治疗组两种凋亡因子的阳性表达率均低于模型组（p < 0.05）。综上，XTN可能通过调控凋亡信号通路——特别是基于网络药理学虚拟筛选结果推断的PI3K-Akt通路——来对抗心肌缺血损伤。

机制通过激活半胱天冬酶和Bcl-2家族，平衡Bcl-2家族中促凋亡（Bax、Bad和Bcl-xs）与抗凋亡（Bcl-2、Bcl-xl）的活性，从而精准调控细胞凋亡过程。