微精选

见图一

CRC 中转移和预后相关基因的筛选、功能预测和初步验证。

图一

A 生物信息学分析程序。

B-D 餐厅三个公共数据集中 ENSG00000267194 的 Kaplan-Meier 曲线。括号中给出了每组中的病例数。

E-J 系列三个公共数据集中富集了ENSG00000267194的脂肪酸 （FA） 和磷脂 （PL） 代谢相关功能。水平轴按表达式的顺序对数据集ENSG00000267194 个案例进行排序，这些情况显示在灰色区域中。中间的彩色竖线表示表达功能相关基因的病例。上部彩色曲线显示了 ES 的计算过程。曲线的峰值离 0 越远，此函数受排名变量影响的可能性就越大。

K qPCR 证实了 2 个 shRNAs 对 CRCMSL 在 SW620 细胞中的敲低效率。

L 脂质组学呈对数的火山图2fold change （对数2FC） 的 CRCMSL 敲除引起的 SW620 细胞中的脂质。脂质组学的 M 气泡图表示由 P 值 < 0.05 和 VIP ≥ 1 （OPLS-DA） 选择的脂质。表示 class 和 −log 的斑点的颜色和大小10分别转换脂质的 P 值。

见图二

铁死亡有助于 CRC 相关 CRC 转移的抑制。

图二

A-B P 值为 <0.05 和 VIP ≥1 （OPLS-DA） 的磷脂 （PLs） 中脂肪酰基链的不饱和分布，基于碳双键。n = 0、n = 1、n ≥ 2 分别代表 SFA 、 MUFA 和 PUFA。A PLs 中具有不同不饱和度的脂肪酰基链的归一化含量 B PLs 中不同不饱和度的脂肪酰基链的百分比 C qPCR 证实慢病毒在 HCT116 中过表达 CRCMSL 的效率。

D-EWestern blot 检测 CRC 细胞中经典铁死亡标志物的蛋白含量。

F-G 型BODIPY 581/591 C11 报道了 CRC 细胞中的脂质过氧化水平。H-ICRC 细胞中的细胞 ROS 水平。

J-KCRC 细胞中的线粒体 ROS 水平。

L-MCRC 细胞中的 GSH 水平。不适用透射电子显微镜观察 CRC 细胞中线粒体的形态。P-S 系列Transwell 侵袭和迁移测定的统计图，其代表性图像如图 S3 所示。P-Q穿过 Matrigel 的 CRC 细胞数反映了侵袭能力。

R-S 系列CRC 细胞的数量直接迁移到具有高血清浓度反映迁移能力的一侧。qPCR、western blot、流式细胞术和 Transwell 检测的每个结果至少代表三个独立的重复。

见图三

CRCMSL 降低膜流动性以抑制 CRC 转移。

图三

A Laurdan 广义极化 （GP） 检测的原理和程序。

B-C 型Laurdan GP 的代表性 GP 图像（左）和统计图（右）。较高的 GP 值表示更有序的磷脂双层。

D FRAP 测定程序。

E-FFRAP 分析的荧光恢复曲线（左）和半恢复时间（右）。更高的 T半代表磷脂双层的较低膜流动性。

G-JTranswell 侵袭和迁移测定的统计图，其代表性图像如图 S4 所示。

G-H穿过 Matrigel 的 CRC 细胞数反映了侵袭能力。I-J直接迁移到高血清浓度一侧的 CRC 细胞数量反映了迁移能力。每个结果至少代表三个独立的重复。

见图四

CRCMSL 通过促进 CRC 细胞中 ACC1 的磷酸化来限制 ACC 活性。

图四

A 用于 CRCMSL 与脂肪酸代谢的两种关键酶之间相互作用的 RNA 沉降测定。对蛋白质信号进行定量（相对于输入）并在泳道下方标记，细胞裂解物 （input） 作为阳性对照，反义 （AntiS） 作为阴性对照。

B-C 型用于 ACC1 和 CRCMSL 之间相互作用的 RIP 检测。通过 PCR 从 ACC1 免疫沉淀产物中检测到 B CRCMSL （2629 bp），其中细胞裂解物 （Input） 作为阳性对照，兔 IgG （IgG） 作为阴性对照。放大信号（相对于 Input）被量化并标记在通道下方。

C qPCR 显示 ACC1 富集的 CRCMSL 相对于 IgG 的倍数变化。

D-F qPCR 检测 CRC 细胞中 ACC1 的转录水平。RNA 水平通过 GAPDH 标准化。

G-IWestern blot 检测 CRC 细胞中 ACC1 和 P-ACC1 （Ser79） 的蛋白含量，具有代表性图像和统计图。

J-KCRCMSL 和 ACC 口服抑制剂 ND630 对 ACC 活性的疗效。除 RNA pull-down 外，每个结果都代表至少 3 个独立的重复。

见图五

CRCMSL 通过抑制 CRC 细胞中的 ACC 活性来降低膜流动性。

图五

A 蛋白质印迹法检测 CRC 细胞中经典铁死亡标志物的蛋白质含量，具有代表性图像（左）和统计图（右）。B CRC 细胞中的细胞 ROS 水平。CRC 细胞中的 C GSH 水平。

D BODIPY 581/591 C11 报告了 CRC 细胞中的脂质过氧化水平。

E-FLaurdan GP 的代表性 GP 图像和统计图表。较高的 GP 值表示更有序的磷脂双层。E CRCMSL 过表达和 0.2 μM ND630 对 HCT116 细胞磷脂双层顺序的影响。D CRCMSL 敲低和 40 nM ND630 对 SW620 细胞中磷脂双层顺序的影响。

G-HFRAP 分析的荧光恢复曲线（左）和半恢复时间（右）。较高的 Thalf 表示磷脂双层的膜流动性较低。G CRCMSL 过表达和 0.2 μM ND630 对 HCT116 细胞膜流动性的影响。

H CRCMSL 敲低和 40 nM ND630 对 SW620 细胞膜流动性的影响。

I-L （英语）Transwell 侵袭和迁移测定的统计图，其代表性图像如图 S6 所示。

I-J穿过 Matrigel 的 CRC 细胞数反映了侵袭能力。K-L直接迁移到高血清浓度一侧的 CRC 细胞数量反映了迁移能力。每个结果至少代表三个独立的重复。

见图六

CRCMSL 通过限制脂肪酸代谢来抑制体内 CRC 进展。

图六

A 在 BALB/c 裸鼠中构建原位和皮下异种移植物的 A&D 程序。

B-C 型CRCMSL 过表达对原位 （B） 和皮下 （C） 异种移植物的影响，限制脂肪酸代谢。E-F5 mg/kg ND630 处理对原位 （E） 和皮下 （F） 异种移植物联合 CRCMSL 过表达的影响。

D 皮下异种移植物的 H&E 和 IHC 染色，如图 6C。

好了，今天的文献解读就到这儿来，我们下期再见！