ARO-HBV [JNJ-73763989（JNJ-3989）] 是一款由 Arrowhead Pharmaceuticals 开发用于慢性乙型肝炎治疗的RNAi疗法药物，包含两个GalNAc共轭的 siRNA（JNJ-73763976 和 JNJ-73763924)。目前该药正在跟Bepirovirsen (GSK3228836，GSK836) 进行序贯用药用于慢性乙型肝炎治疗的评估（查看详细内容：重磅！在研乙肝新药JNJ-3989和Bepirovirsen序贯治疗慢乙肝IIb期临床试验单位公布（附名单））。
JNJ-56136379 (bersacapavir，JNJ-6379）是一款由 Janssen pharmaceuticals 开发用于慢性乙型肝炎治疗的乙型肝炎病毒(HBV)衣壳组装调节剂(CAM)。2023年，由于该药实际临床疗效未达预期，已被终止开发。
研究人员在免疫耐受期慢性乙型肝炎病毒感染者中进行了一项评估JNJ-3989±JNJ-6379+NA基础上加用PegIFN-α2a治疗安全性和有效性的REEF-IT研究（NCT04439539）。相关研究结果此前已部分公布（查看详细内容：AASLD2023：JNJ-3989±JNJ-6379+NA序贯PegIFN治疗免疫耐受期慢乙肝临床数据公布），研究人员近日在Gut杂志上发表了该项研究的完整结果。
研究招募了HBeAg 阳性、HBV DNA ≥20 000 IU/mL 、丙氨酸转氨酶（ALT）<2倍正常值上限（ULN）的目前未治疗或未经治免疫耐受期慢性乙型肝炎病毒感染者作为受试对象，受试者先接受36-52 周（诱导期）JNJ-3989（200mg，每四周一次）±JNJ-6379（250mg，每日一次）+NA治疗，后接受 12 周 PegIFNα2a 180 微克 QW 附加治疗（巩固期）。治疗结束后进行为期48周的随访，期间达到NA停药标准(HBsAg <10 IU/mL, HBeAg阴性, HBV DNA <LLOQ, ALT <3×ULN; )的受试者停药。
主要终点是随访第24周（FUW24）停止所有治疗的参与者中，获得表面抗原血清清除率（HBsAg <0.05 IU/mL）的比例。
研究结果
受试者基线特征
在亚洲、欧洲和北美的 49 个中心入组54 名 NCT 患者。参与者中男性占 51.9%，亚洲人占 55.6%，平均（SD）年龄为 33.6（10.58）岁。47 名（87.0%）参与者为初治患者，7 名（13.0%）有短期 NA 既往使用史，平均（SE）使用时间为 5.66（1.09）个月。在诱导期，54 名参与者中有 27 名接受了 JNJ-3989+NA +bersacapavir（停药前使用时间为 2 至 32 周），另 27 名仅接受 JNJ-3989+NA，无 bersacapavir；在 IFN 加用期，没有参与者接受 bersacapavir。
基线时，HBV DNA、HBeAg 和 HBsAg 的平均值（SD）分别为 7.93（1.04）、2.49（1.08）和 4.65（0.54）log10 IU/mL。ALT 平均（SD）水平为 36.3（55.85）U/L。68.5% 的参与者符合 IT 定义（基线时 HBV DNA≥10^7 IU/mL 且 ALT 正常），54.7% 感染 HBV B 或 C 型，34% 感染 D 型。
有效性
主要终点
没有参与者达到功能性治愈的主要终点（在停止所有研究干预措施后24周内HBsAg血清学清除，并且没有重新开始NA治疗）。
次要终点
NA治疗完成情况
两名受试者在治疗结束时（EOT）达到NA完成标准，其中一名停止了所有治疗。基线时，该受试者的HBsAg和HBeAg水平分别为4856.81 IU/mL和0.7 IU/mL。在随访第48周（FUW48），HBsAg和HBeAg水平分别为0.21 IU/mL和0.15 IU/mL，尽管HBeAg水平在整个随访期间在可检测和不可检测之间波动，且HBV DNA在随访期间保持在低于定量下限（<LLOQ），且未重新开始NA治疗。在入组时，该受试者为抗-HBs阴性，在随访期间产生了短暂的抗-HBs应答，在随访第12周（FUW12）达到峰值278 mIU/mL，并在随访第48周降至9.2 mIU/mL。
HBsAg 值
相较于基线，平均 (标准误) HBsAg 变化在 EOI、EOT 和 FUW48 分别为 –2.85 (0.13)、–3.61 (0.18) 和 –2.63 (0.26) log10 IU/mL（图 3A）。尽管在 JNJ-3989+IFN 治疗后平均 HBsAg 水平有所上升，但有 24.0% 的参与者在随访期间 HBsAg 水平保持稳定或下降（从 EOT 到 FUW48 HBsAg 增加 <0.2 log10 IU/mL）。
在 EOI、EOT 和 FUW48 时，分别有 80.9%、89.8% 和 49.0% 的参与者 HBsAg 比基线下降 ≥2 log10 IU/mL，分别有 48.9%、67.3% 和 36.7% 的参与者 HBsAg <100 IU/mL（图 3B 和图 3C）。在 12 周 IFN 联合治疗阶段结束时，分别有 61.7%、23.4% 和 4.3% 的参与者 HBsAg 比 EOI 水平进一步下降 ≥0.5、≥1.0 和 ≥2.0 log10 IU/mL。
为进一步评估 IFN 对 HBsAg 动力学的影响，进行了一个探索性事后分析，结果显示将 IFN 加入 JNJ-3989+NA 治疗时，有 17/49（34.7%）的参与者 HBsAg 比预测下降值（即 IFN 开始前 HBsAg 动力学的线性外推）额外减少 >0.5 log10 IU/mL；其中一些参与者在随访期间保持了这种下降（图 3A）。
HBsAg血清学清除
54名参与者中有11名（20.4%）在研究期间至少有一次实现了HBsAg血清清除（HBsAg水平 <LLOQ），并且所有人在干扰素附加治疗和/或随访期间抗HBs水平至少出现了短暂升高（图4）。在随访第48周（FUW48），有六名参与者仍然HBsAg阴性，八名仍然抗HBs阳性（范围从9.24到1218 mIU/mL）。在保持HBsAg阴转的参与者中，抗HBs滴度保持稳定且较高；在随访期间出现HBsAg血清逆转的参与者中，抗HBs滴度有所下降。
被定义为IT组和非IT组的参与者中，获得HBsAg血清学清除的比例相似（分别为7/37（18.9%）和4/17（23.5%）），在FUW48时，分别有5/7和1/4仍保持HBsAg阴性。具有和不具有HBsAg清除的参与者在基线和疾病特征上差异不大。样本量有限，但在那些在研究结束时仍维持HBsAg清除的参与者中，亚洲人群比例较高、女性占比略高、年龄略轻的趋势可能存在，相较于其他所有参与者。
HBeAg 值及血清清除率
HBeAg 从基线的平均（标准误）变化在EOI、EOT及随访第48周（FUW48）分别为 –1.69（0.08）、–2.21（0.11）和 –2.47（0.17）log10 IU/mL（图5A）。总体而言，53 名受试者中有 16 名（30.2%）至少出现过一次 HBeAg 血清清除，12 名（22.6%）在 FUW48 时出现 HBeAg 血清清除（图5B）。在 FUW48 出现 HBeAg 血清清除的 12 名受试者中，有 10 名转为抗 HBe 阳性。在 EOI、EOT 和 FUW48 时，分别有 87.0%、93.8% 和 91.7% 的受试者 HBeAg 水平下降 ≥1 log10 IU/mL，分别有 19.6%、37.5% 和 47.9% 的受试者 HBeAg 水平降至 <1 IU/mL（图5C）。
HBsAg和HBeAg血清清除
研究中有六名参与者至少一次同时实现了HBeAg和HBsAg血清清除；其中四名参与者在相同时间点实现了两项指标的血清清除，其中两名参与者为随访第48周时（FUW48）。如使用JNJ-3989的其他研究所示，大多数实现HBsAg和/或HBeAg血清清除的参与者仍为HBcrAg阳性。
ALT和HBsAg
整体来看，那些对IFN表现出ALT反应的参与者，HBsAg下降更明显并在随访期间维持时间更长。共有25名参与者符合这一标准。相较于基线，对比没有ALT反应与对IFN有ALT反应的参与者，HBsAg平均（SE）变化在EOT时分别为–3.45（0.25）vs –3.71（0.27），在FUW48时分别为–2.19（0.35）vs –3.10（0.40）。六名在FUW48时HBsAg血清清除的参与者中有五名符合IFN ALT反应的定义。在24名对IFN有ALT反应且FUW48有数据的参与者中，15名（62.5%）和8名（33.3%）HBsAg较基线下降≥2和≥4 log10 IU/mL。在22名没有ALT反应的参与者中，分别有8名（36.4%）和4名（18.2%）维持这些下降限值。
HBV DNA
相较于基线，HBV DNA平均（SE）变化在EOI、EOT和FUW48分别为–6.13（0.15）、–6.29（0.14）和–6.64（0.16）log10 IU/mL（图6A）。在EOI、EOT和FUW48时，分别有21名（44.7%）、15名（31.3%）和40名（81.6%）参与者的HBV DNA低于LLOQ。在IFN加用期间观察到HBV DNA和ALT的短暂升高，但在随访阶段水平再次下降（图6）。总体上，5名（9.3%）参与者出现病毒学突破（VBT）；其中两名在诱导期，四名在仅使用NA的随访期，有一名在诱导期和随访期各经历一次VBT。
HBV RNA 和 HBcrAg 平均值 (SE)
HBV RNA 从基线的变化在 EOI、EOT 和 FUW48 分别为 –2.96 (0.16)、–3.77 (0.16) 和 –3.28 (0.20) log10 拷贝/mL。EOT 时有 54.2% 的参与者 HBV RNA 达到检测下限 (LOD) 以下；在 FUW48，大多数仍为 HBV RNA 阴性（45.8% <LOD；54.2% <LLOQ）。在停止 bersacapavir 的参与者中，治疗期间观察到 HBV RNA 暂时升高；然而，在继续 JNJ-3989 + NA 治疗后，水平再次下降。所有 11 名 HBsAg 阴转的参与者在随访期间均保持 HBV RNA 阴性(<LOD)。
HBcrAg 从基线的平均变化 (SE) 在 EOI、EOT 和 FUW48 分别为 –1.82 (0.09)、–2.25 (0.10) 和 –2.42 (0.17) log10 IU/mL。在研究期间，没有参与者达到 HBcrAg <LLOQ（3.0 log10 U/mL），仅有三名参与者在 FUW48 时 HBcrAg 水平低于 4.0 log10 U/mL。
安全性
没有发生死亡、严重不良事件（SAE）或导致JNJ-3989±bersacapavir治疗中断的不良事件（AE）；有两名参与者因不耐受而必须停止干扰素（IFN）治疗（其中一人出现ALT/天冬氨酸转氨酶（AST）升高；另一人出现血小板减少）。经历不良事件的参与者比例在诱导期（83.3%）和IFN加用期（85.7%）相似，并在随访期间下降至64.7%（表2）。在诱导期（5.6%）和IFN加用期（6.1%）各有三名参与者，以及随访期间（2.0%）各有一名参与者经历≥3级不良事件。所有被认为与研究治疗相关的≥3级不良事件（n=3）都仅与IFN相关。
ALT/AST爆发
在诱导期期间，有1名（1.9%）参与者观察到生化反应性加剧（确认的ALT和/或AST≥3倍ULN且≥3倍最低值）（ALT和AST均加剧），在IFN加用期间有6名（12.2%）参与者出现生化反应性加剧（均为ALT升高；其中1名也出现AST升高）。在加剧期间的ALT峰值分别为诱导期265 U/L和IFN加用期220 U/L。1名参与者在基线时出现非确认的ALT峰值426 U/L，但未满足加剧标准。在随访期间，4名（7.8%）参与者发生了治疗中生化反应性加剧。值得注意的是，在两名参与者中，治疗中生化反应性加剧开始于IFN加用期，并在部分随访期间持续存在。
唯一符合NA停药标准的参与者在随访期间没有出现ALT/AST爆发或异常。
讨论（略）
结论
将pegIFN-α2a加入JNJ-3989+ NA治疗，使20%的目前未接受治疗、HBeAg阳性的参与者出现HBsAg血清清除，其中大多数处于HBeAg阳性的慢性HBV感染（IT）阶段。这一结果明显优于仅使用这些化合物或在病毒学受控的CHB患者中用JNJ-3989联合pegIFN-α2a进行附加治疗的研究中观察到的清除率，这表明疾病早期阶段的患者（HBV特异性T细胞功能障碍较轻）对抗病毒和免疫刺激联合治疗方案的反应能力更强，无论其在治疗开始时表现出的抗原水平多高。尽管本研究存在局限性，并且在随访第24周没有参与者达到功能性治愈，REEF-IT的这些发现对于未来针对功能性治愈的研究中的患者选择仍具有高度参考价值。