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在这篇研究中，作者探讨了新型salidroside衍生物SHPL-49在大鼠永久性中动脉闭塞(pMCAO)模型中的神经保护机制。结果表明，口服SHPL-49能够显著改善神经功能、减少脑梗死体积，并通过调节脂质代谢和抑制与铁死亡相关的ACSL4-GPX4通路来减轻脑缺血引起的神经退行性变。这一发现为SHPL-49作为潜在的缺血性中风治疗药物提供了重要的实验依据。
1. 评估SHPL-49灌胃给药14天对大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型的神经保护作用
图1A展示了实验设计示意图。TTC染色显示永久性大脑中动脉闭塞模型组大鼠脑梗死体积较假手术组显著增加，而90 mg/kg SHPL-49及丁苯酞干预后梗死体积明显缩小（图1B）；神经功能评分表明，模型组评分显著高于假手术组，而各给药组评分均显著降低（图1C）；行为学测试中，模型组穿梭箱实验错误次数与潜伏期均显著增加，抓力显著下降，而90 mg/kg SHPL-49与丁苯酞能有效减少错误次数、缩短潜伏期并增强抓力（图1D， 1E， 1F）；组织病理学观察进一步证实，模型组神经元损伤严重、尼氏体减少，而给药组细胞形态更完整、尼氏体更密集（图1G， 1H）。综上所述，SHPL-49灌胃给药对永久性大脑中动脉闭塞大鼠具有明确的神经保护作用。
图1.评估pMCAO大鼠经胃内给予 SHPL -49 14天治疗后的神经保护作用
2. 建立一种用于大鼠脑组织脂质代谢的多变量统计分析方法
采用皮尔逊相关系数评估分析稳定性，所有质控样本相关系数均高于0.98，表明检测过程稳定且数据质量可靠（图2A, 2B）。主成分分析结果显示模型组、质控组、SHPL-49组与假手术组样本呈明显分离趋势（图2C, 2D）。偏最小二乘判别分析模型进一步强化了组间区分度，正负离子模式下均可见假手术组与模型组明显分离（图2E-2H）。置换验证表明回归线Q2的Y轴截距均低于0，证实模型未出现过拟合（图2I-2L）。结果证实脂质组学分析数据质量可靠，模型构建有效且各组间代谢特征差异显著。
图2.正离子与负离子模型中脑组织脂质代谢的多变量统计分析
3. 对大鼠脑组织脂质代谢物的初步分析
对大鼠脑组织脂质代谢物的初步分析结果显示，模型组与假手术组相比存在1458种差异脂质，而经SHPL-49治疗后差异脂质减少至50种，火山图（图3A-3D）与热图（图3E-3F）直观展示了各组脂质代谢物的差异表达谱（图3A-F）。维恩图分析（图3G-3H）进一步揭示了三组间存在9种与缺血性脑卒中相关的共同差异脂质，主要涉及甘油磷脂代谢、鞘脂代谢和脂肪酸代谢三大类别（图3G-H）。综上，SHPL-49可通过调节特定脂质代谢物表达对缺血性脑卒中发挥潜在治疗作用。
图3.大鼠脑组织中差异脂质代谢物的鉴定
4. 三个队列中脑组织代谢脂质变化
与假手术组相比，模型组中七种脂质（OxPE (16:0–18:1+3O)、PE (18:2e/22:5)、PE (16:1e/22:5)、PS (18:0/22:4)、PC (22:3e/13:0)、PE (20:5/20:5)及MK 6）水平呈上升趋势（图4A-G）；而SHPL-49组与模型组相比，这些脂质均显著下降（图4A-G）。图4H-I进一步显示：与假手术组相比，模型组中OxPE (16:0–22:6+1O)及(3β,24R)-麦角甾-5-烯-3-基-6-O-棕榈酰-β-D-吡喃葡萄糖苷显著降低（图4H-I）；SHPL-49组与模型组比较，OxPE (16:0–22:6+1O)水平进一步下降，而(3β,24R)-麦角甾-5-烯-3-基-6-O-棕榈酰-β-D-吡喃葡萄糖苷未见明显变化（图4H-I）。综上所述，SHPL-49能显著逆转缺血性中风大鼠脑组织中多种脂质代谢物的异常变化。
图4.三个队列中脑组织脂质代谢的改变
5. SHPL-49通过抑制铁死亡发挥神经保护作用的研究
模型组脑组织亚铁离子浓度较假手术组显著升高，而SHPL-49干预后其浓度显著降低（图5A）；模型组ACSL4蛋白表达水平显著上升，SHPL-49治疗可有效改善其表达（图5B-C）；模型组GPX4表达显著降低，SHPL-49能明显提升其表达水平（图5B-D）；OGD诱导的PC12细胞线粒体膜电位显著降低，SHPL-49可有效逆转该现象（图5E-F）；OGD组细胞内Fe2+含量显著升高，SHPL-49处理后明显下降（图5G-H）；OGD组脂质ROS含量显著上升，SHPL-49能有效降低其水平（图5I-J）；OGD组ACSL4表达升高而GPX4表达降低，SHPL-49干预可显著下调ACSL4并上调GPX4表达（图5K-N）。结果表明SHPL-49通过调控ACSL4-GPX4通路抑制铁死亡，从而发挥神经保护作用。
图5. SHPL -49对抑制铁死亡的影响
6. SHPL-49是一种新型糖苷，通过抑制铁死亡减轻脑缺血损伤
SHPL -49 是通过结构修饰沙利度胺苷获得的一种新型糖苷化合物。它通过多种机制抑制铁死亡，发挥神经保护作用，有效减轻脑缺血损伤。
图6.SHPL -49对抗急性脑缺血所致大鼠铁死亡损伤的机制示意图
结论
这项研究探讨了新型salidroside衍生物SHPL-49在大鼠永久性中脑动脉闭塞（pMCAO）模型中的神经保护机制。研究结果表明，口服SHPL-49（90 mg/kg）显著改善了大鼠的神经功能和认知能力，减少了脑梗死体积，并通过调节脂质代谢和抑制铁死亡（ferroptosis）来发挥作用。SHPL-49通过调控ACSL4-GPX4通路，改善了脑脂质代谢紊乱，显示出其在缺血性中风治疗中的潜在应用价值。
此外，研究还发现SHPL-49能够显著降低脑组织中的亚铁离子浓度，并通过抑制ACSL4的表达和促进GPX4的表达来减轻铁死亡的发生。这些结果表明，SHPL-49通过调节脂质代谢和抑制铁死亡，可能为缺血性中风的治疗提供了一种新的治疗策略。
在该研究中，研究人员使用了赛昂斯避暗穿梭测试仪（SANS SA222）和大小鼠抓力测定仪（SANS SA415）来进行实验操作。
SA222 避暗穿梭测试仪
SA222 是一款专为避暗与穿梭实验开发的高精度行为学分析仪器，广泛应用于神经科学、心理学、药物研发及临床行为评估等领域。该仪器通过自动化的行为监测与智能数据分析，高效支持对焦虑、恐惧反应及学习记忆能力的深入研究，适用于抗焦虑/抑郁药物的药效筛选、神经机制解析、行为适应能力评估以及临床诊疗模型构建，为科研与转化医学提供可靠、高效的数据支撑。
仪器具备三项核心优势：第一，实验模式支持避暗与穿梭灵活切换，适配多元研究需求；第二，采用高密度红外扫描技术，确保对动物行为信号的精准捕捉与无干扰检测；第三，具备1~1000秒可调适应期功能，有效平复动物初始应激状态，保障实验数据的可靠性与准确性。
SA415 大小鼠抓力测定仪
SA415是一款为检测大鼠及小鼠四肢、双肢或单肢抓力的精密仪器，广泛应用于神经科学、药理学及行为学研究。仪器主要用途包括：评估肌肉功能、监测神经损伤或疾病模型的运动能力、筛选药物对神经肌肉的影响，以及分析行为学实验中的运动变化，为疾病机制研究和药物开发提供关键数据。
仪器通过高精度力传感器实时检测动物抓握或拉扯时施加的力量，并将其转换为电信号。数据采集系统记录并分析信号强度（与抓握力成正比），最终输出图表及数值结果。独特的高精度角度传感器，分辨率达0.1°，测量范围-30°~60°，具备高灵敏度和优异稳定性，可满足多种检测需求。仪器还配备大容量存储系统，支持2000条以上实验数据的本地存储，充分满足用户的长期数据管理需求。