临床微生物实验室中,培养基(平板)是分离、鉴定病原微生物的核心工具。根据微生物的营养需求、生长特性及检测目的,常用培养基可分为基础培养基、选择性培养基、鉴别培养基和特殊培养基。下面让我们一起来认识一下微生物室常用的培养基平板。
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用途:广谱分离需氧/兼性厌氧细菌(如链球菌、葡萄球菌、肠球菌等),观察溶血现象。
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组成:基础琼脂 + 5%~10%脱纤维羊血。
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菌落特征:
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α溶血:部分溶血,菌落周围呈草绿色环(如肺炎链球菌)。
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β溶血:完全溶血,透明溶血环(如化脓性链球菌)。
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γ溶血:无溶血(如肠球菌)。
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注意事项:需5%~10% CO₂环境培养苛养菌(如某些链球菌)。
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用途:鉴别肠道革兰阴性杆菌(如大肠埃希菌、克雷伯菌、沙门菌)。
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组成:葡萄糖(无乳链球菌发酵葡萄糖) + 溴麝香草酚蓝(酸碱指示剂) + 多黏菌素(抑制其他细菌生长)。
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菌落特征:
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乳糖发酵菌(如大肠埃希菌):粉红色菌落(产酸)。
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非乳糖发酵菌(如沙门菌):无色或淡黄色菌落。
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注意事项:不可用于分离苛养菌(如志贺菌可能生长不良)。
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用途:分离真菌(如念珠菌、曲霉菌、皮肤癣菌)。
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组成:葡萄糖 + 蛋白胨(低pH抑制细菌生长)。
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菌落特征:
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酵母菌(如白念珠菌):乳白色、光滑菌落。
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丝状真菌(如曲霉菌):绒毛状菌落,产色素。
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注意事项:丝状真菌25-30°C培养更好,部分需添加氯霉素抑制细菌。
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用途:分离苛养菌(如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌)。
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组成:加热裂解红细胞后的血琼脂(释放X、V因子)。
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菌落特征:菌落较小、透明或灰白色(如流感嗜血杆菌呈“露滴样”)。
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注意事项:需5%~10% CO₂环境,不可替代血琼脂(无法观察溶血)。
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用途:分离军团菌属(Legionella spp.),尤其是嗜肺军团菌(L. pneumophila)。
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组成:
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活性炭(吸附毒性代谢产物)+ 酵母浸膏(营养来源)。
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必需添加成分:L-半胱氨酸(军团菌生长必需)、焦磷酸铁(提供铁离子)。
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选择性培养基中可加入抗生素(如GVPC:甘氨酸、万古霉素、多粘菌素B、放线菌酮)。
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菌落特征:
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白色或蓝灰色、凸起、边缘光滑的菌落,可能有虹彩光泽。
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培养3~5天可见生长。
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培养条件:需高湿度环境,35~37°C培养,部分菌株需延长至7天。
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注意事项:
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需排除环境中军团菌污染(如水源样本需酸处理后再接种)。
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用途:选择性分离淋病奈瑟菌。
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组成:
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基础琼脂 + 血红蛋白 + 万古霉素(抑制革兰阳性菌)+ 多粘菌素(抑制革兰阴性菌)+ 制霉菌素(抑制真菌)。
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添加IsoVitaleX或类似补充剂(提供生长因子如维生素、氨基酸)。
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菌落特征:
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淋病奈瑟菌:微小(0.5-1mm)、透明至灰白色、湿润菌落。
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其他奈瑟菌(如脑膜炎奈瑟菌)也可能生长,需进一步鉴别。
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培养条件:需5%CO₂37°C培养24~48小时。
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注意事项:
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不可用于长期保存菌种(营养要求苛刻)。
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需结合氧化酶试验和糖发酵试验确认鉴定。
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用途:选择性分离沙门菌和志贺菌。
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组成:胆盐 + 柠檬酸盐 + 硫代硫酸钠(抑制非致病菌)。
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菌落特征:
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沙门菌:无色透明菌落,中心黑点(产H₂S)。
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志贺菌:无色透明菌落(不产H₂S)。
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注意事项:可能抑制部分沙门菌(如伤寒沙门菌需增菌培养)。
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用途:选择性分离和鉴别弧菌属(如霍乱弧菌、副溶血弧菌)。
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组成:胆盐 /柠檬酸盐(选择性抑制革兰阳性菌和部分肠道菌) + 硫代硫酸钠(提供硫源,支持弧菌代谢)+ 高盐浓度(模拟海水环境,促进弧菌生长)。
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菌落特征:
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霍乱弧菌:黄色菌落,边缘透明。
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副溶血弧菌:蓝绿色菌落,透明或半透明。
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注意事项:某些气单胞菌或邻单胞菌可能生长。
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用途:快速鉴定念珠菌属。
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组成:底物酶显色反应(不同菌种显示不同颜色)。
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菌落特征:
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白念珠菌:绿色。
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光滑念珠菌:紫色。
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克柔念珠菌:粉红色。
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优点:缩短鉴定时间(24~48小时)。
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用途:快速筛查和鉴别尿路感染常见病原体(如大肠埃希菌、克雷伯菌)。
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组成:
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显色底物(不同菌种代谢特定酶产生颜色差异)。
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抑制成分(如胆盐抑制部分革兰阳性菌)。
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菌落特征:
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克雷伯菌/变形杆菌:无色或金属蓝色菌落。
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大肠埃希菌:粉红色至紫色菌落(β-葡萄糖醛酸酶阳性)。
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优点:24小时内显色,缩短报告时间。
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用途:主要用于抗生素敏感性测试。
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组成:
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牛肉浸粉(提供细菌生长所需的氮源、碳源及微量元素)。
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酪蛋白水解物(补充氨基酸和短肽,促进细菌生长)。
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淀粉:吸附细菌代谢产生的毒素,避免干扰抗生素活性
传统微生物平板仍是病原体分离鉴定的“金标准”,凭借成本低、直观性强和广泛适用性,在医院中不可替代。显色培养基(如尿道产色平板、科玛嘉念珠菌平板)通过酶底物反应显著缩短鉴定时间,成为快速筛查的主流选择。然而,苛养菌(如军团菌)、混合感染及耐药性检测仍依赖复杂培养条件和后续分子验证。
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智能化:自动化接种/判读系统与AI图像分析结合,提升效率并减少人为误差;
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精准化:靶向基因编辑菌株的定制培养基(如CRISPR增强选择性)、耐药表型快速检测平板;
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多组学整合:平板培养与质谱(MALDI-TOF)、宏基因组测序联动,实现“培养-鉴定-药敏”一站式诊断;
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床边化:微流控芯片集成平板功能,推动感染诊断向POCT(床旁检测)场景渗透。
未来,微生物平板将不再是孤立工具,而是智能诊断网络中的关键节点,为精准抗感染治疗提供更高效的决策支持。