一、免疫组化双染技术作用：免疫组化双染技术对于消化道早期癌浸润的病理诊断是一项极其重要的辅助手段。然而在实际工作中，很难判断ESD标本黏膜下层是否有早期浸润及浸润深度。目前国内、外针对消化道早期癌ESD标本浸润深度的判断主要依靠常规HE染色或单一的免疫组化指标。CK（pan）/Desmin免疫组化双染法可以在同一张切片上同时显现消化道早期癌的癌组织和黏膜肌层，有助于病理医师在同一张切片上更加直观地观察肿瘤微小浸润情况及肿瘤和黏膜肌的关系，精确测量浸润深度等，有利于病理医师对内镜切除术后的标本做出精准评估。
二、免疫组化双染技术简述：是一种可以在组织中同时标记两类不同抗原的方法，每类抗原可以由一到两种抗体（显示同种颜色）标记，而两类抗原显示两种不同的颜色，从而实现在同一组织中的不同细胞类型表达。由于免疫组织化学双染技术的此种特性，可同时双染腺上皮细胞层和肌上皮细胞层，对消化道早期浸润癌的诊断提供帮助。通过将特异性腺上皮细胞标志物CK（pan）和肌上皮细胞标志物（Desmin）搭配，可以提高消化道早期浸润癌的确诊率及诊断效率，具有一定的临床应用价值。
三、制片过程：10%中性缓冲福尔马林固定ESD标本12~48h，确定改刀方向后，按照每2~3mm的距离下刀平行地切割组织，并将所有组织取材检查，按标本改刀后的相对位置关系进行组织包埋，行HE染色和CK（pan)/Desmin免疫组化双染。
四、质量控制
每一批次检测样本均应同时设立阳性/阴性对照及空白对照。
阳性对照样本可选用阑尾。通常阳性对照样本中存在大量未染色细胞，可作为阴性质控位点。阴性对照样本用于监控试剂及操作过程是否正确，是否存在非特异性染色。如果阴性对照样本染色结果为阳性或大量背景着色，则待测样本的检测结果应视为无效。
空白对照试剂一般可用抗体稀释液代替。通常用于替代一抗检测质控组织，用于判断是否存在非特异性染色或污染。如果空白对照试剂质控染色结果为阳性或大量背景着色，则实验标本的检测结果应视为无效。 应有HE染色结果作为对照。
五、结果判读
阳性：Desmin为红色的细胞质染色，CK（pan）为棕黄色的细胞质染色。阴性：未观察到红色细胞质染色或棕黄色的细胞质染色。
六、注意事项
1.免疫组织化学双染检测是一种需要通过多个检测步骤共同完成的组织染色过程。在试剂的选择、ESD标本固定、取材、处理、切片的制备、染色结果的判读上均需要进行专门的技术培训。
2.任何阳性或阴性结果的解读，应由病理科医师结合病理形态学、临床表现及其他检测方法判读，不作为单独的诊断指标。
3.复染过度或不足都可能影响结果的判读。
4.不恰当组织处理流程将直接影响免疫组化染色效果，造成假阳性、抗体定位不准确或假阴性结果。结果不一致可能是样本固定和包埋方法不同或组织样本内固有差异造成的。
5.阴性结果表示未检出抗原，不一定表示样本中无该抗原存在。待测抗原编码基因变异、抗原低表达、抗原修复不当或孵育时间不足等，都会造成抗原无法检出。